凝膠遷移實(shí)驗(yàn)EMSA
服務(wù)目的：
檢測待測樣品中特定目的核蛋白的轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性。
服務(wù)原理：
蛋白質(zhì)可以與末端標(biāo)記的核酸探針結(jié)合，在瓊脂糖膠或非變性膠中電泳時(shí)這種復(fù)合物比無蛋白結(jié)合的探針在凝膠中泳動(dòng)的速度慢，即表現(xiàn)為相對滯后。該方法可用于檢測DNA結(jié)合蛋白、RNA結(jié)合蛋白，并可通過加入特異性的抗體（supershift）來檢測特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)行未知蛋白的鑒定。
服務(wù)材料：
試劑：核蛋白提取試劑盒、bradford法蛋白含量測定試劑盒、生物素標(biāo)記 3’端 DNA試劑盒、Lightshift EMSA Optimization & Control Kit、化學(xué)發(fā)光法核酸檢測試劑盒。
儀器：恒溫培養(yǎng)箱、蛋白電泳儀、低溫冰箱。恒溫水浴箱、紫外交聯(lián)燈、振蕩器、脫色搖床。
服務(wù)方法：
1、核蛋白樣本提取與蛋白定量。
2、生物素標(biāo)記DNA3’端并去吹TdT。
3、Super-Shift反應(yīng)，配制6.5%聚丙烯酰胺凝膠，配制好各反應(yīng)體系，EMSA室溫結(jié)合反應(yīng)20min，電泳上樣。
4、電轉(zhuǎn)膜，操作方法同常規(guī)Western blot轉(zhuǎn)膜操作。
5、紫外交聯(lián)，將核酸交聯(lián)于PVDF膜上。
6、化學(xué)發(fā)光法檢測生物素標(biāo)記的探針。
客戶提供：
1、客戶提供組織、細(xì)胞，公司提取核蛋白并進(jìn)行蛋白濃度測定；
2、客戶提供核蛋白，公司進(jìn)行蛋白濃度測定；
3、客戶提供已知濃度的核蛋白，公司進(jìn)行EMSA實(shí)驗(yàn)。
交付內(nèi)容：
樣品質(zhì)檢報(bào)告、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)方法及樣品EMSA電泳圖。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實(shí)驗(yàn)，病理實(shí)驗(yàn)，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等，能夠進(jìn)行藥效學(xué)評價(jià)、毒理學(xué)評價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)！
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